PRINCIPIOS DE  DESINFECCIÓN Y ESTERILIZACIÓN

 Lic. Marcelino Auccasi Rojas.

GENERALIDADES

Es importante precisar que eliminar por completo los gérmenes  y la posibilidad de que los pacientes que entran en un hospital contraigan una enfermedad nosocomial es un imposible. Ya que muchos de los microorganismos que acaban provocando una infección nosocomial conviven de forma pacífica con el personal.

Por ejemplo, el enterococo, una bacteria inofensiva que reside en el intestino de todas las personas, puede convertirse en mortífera si penetra en el sistema sanguíneo. Otro caso: el stafilicoco, que de forma natural está en la piel, sin causar ningún daño a su huésped, puede viajar a través de una catéter y causar una infección de vejiga.

Los factores principales que pueden alterar la coexistencia pacífica de estos microorganismos y provocar una rebelión que acabe dañando al anfitrión son: el propio estado del paciente (edad, gravedad de la enfermedad que padece, si está malnutrido, etc); entrar en un ambiente hospitalario y, por tanto, aumentar la probabilidad de estar en contacto con microorganismos malignos que provienen del mismo enfermo, del personal sanitario o de otros pacientes y, finalmente, el uso de técnicas médicas invasivas: la llave, en definitiva, que utilizan estos agentes infecciosos para entrar en el paciente y empezar una infección.

Sin embargo, y a pesar de que los hospitales son un campo abonado para estos microorganismos, las autoridades sanitarias de todos los países batallan para reducir las enfermedades nosocomiales mediante la aplicación de ciertas normas preventivas conocidas mundialmente como precauciones universales.

Precauciones como el simple lavado de manos de todo el personal sanitario antes y después de tocar a cada enfermo han demostrado insistentemente su eficacia. De igual forma la utilización de barreras protectoras ((mascarilla, guantes, etc), uso de antibióticos en forma apropiada, la desinfección y la esterilización de materiales - equipos médicos quirúrgicos (Normas de Higiene). La lista de medidas preventivas para proteger al enfermo, y al propio personal sanitario, de las infecciones nosocomiales, son innumerables.

"Todos los profesionales del sector conocen estas normas y las deben aplicar con rigor para su propia seguridad y la de los pacientes. Las más comunes son: infecciones del tracto urinario, responsables del 26% al 27% de todas las infecciones; las producidas por herida quirúrgica culpables del 17,5% de todas las infecciones adquiridas en el hospital; y la neumonía nosocomial, frecuente entre los que necesitan respirador, y que representan el 20,6%. Y el tipo de paciente con más riesgo de sufrirlas es aquél que tiene que pasar por quirófano o por una unidad de cuidados intensivos.

Para muchos expertos "la mala política antibiótica, dar fármacos de amplio espectro (que pueden atacar a varios microorganismos) en lugar de proporcionar el medicamento exacto para cada tipo de infección, y la memoria bacteriana, son las causas de la aparición de las resistencias".

De hecho, y tras la introducción masiva de la penicilina en los años 50, muchas bacterias como el neumococo (que causa neumonías y meningitis) o el Staphylococus (origen de infecciones generalizadas) -ambas responsables del 50% de las infecciones hospitalarias- han aprendido a defenderse tanto de la sustancia descubierta por Alexander Fleming como de otros antibióticos, antes eficaces.

En este sentido, y a los tres tipos de resistencias que traen de cabeza a la comunidad científica: resistencia del Enterococo a la vancomicina; del Staphylococcus aureus a la meticilina y del Streptococcus pneumoniae a la penicilina, se añade ahora la desarrollada por la Salmonella enterica.

A manera de corolario recordaremos al Dr Ignaz P. Semmelweis es el primer médico que quiso poner freno a las infecciones nosocomiales. El fue quien, hace ya casi 140 años años, insistió en que la causa de la expansión de la fiebre puerperal (un tipo de fiebre que afectaba a las parturientas debido a infecciones contraídas durante el alumbramiento, y que era mortal) que invadía su hospital de Viena se debía a la falta de higiene de los médicos. Al parecer, éstos no se lavaban las manos entre una práctica médica, como eran las autopsias y, otra, los partos. Pero sus colegas le ridiculizaron. Fue, precisamente, en el año de su muerte, 1865, cuando sus teorías fueron probadas y desde entonces la profesión sanitaria ha adoptado como medida higiénica y preventiva el lavado de manos. "Las manos son el primer vehículo de transmisión de un paciente a otro", afirma el doctor MaGuckin, epidemiólogo de la Universidad de Pensilvania.

En el siglo XIX Pasteur demuestra la existencia de los microorganismos y se empieza a descubrir que la causa de numerosas enfermedades son bacterias que se transmiten desde los enfermos a las personas sanas por medio de distintos mecanismos ejem. agua, comida, aire, fomites. En los hospitales las condiciones de limpieza eran precarias, hasta que a partir de los trabajos de Lister, se introdujo la necesidad de utilizar sustancias que mataran a las bacterias durante la cura de heridas, en la limpia del material quirúrgico y de los quirófanos, etc. La primera sustancia utilizada con este fin, fue el fenol.

Las técnicas de desinfección química aparecen en 1874 en Viena cuando Ignacio Semmelweis establece obligatoriamente el lavado de manos en los estudiantes de medicina que atendían a parturientas, disminuyendo hasta un 1% la mortalidad que se producía. En 1865 Lister utilizaba fenol para desinfectar heridas , quirófanos y salas, disminuyendo así la mortalidad en amputados. En 1890 Halsted  introduce los guantes de goma previamente hervidos en las intervenciones quirúrgicas.

Sin embargo, un estudio llevado a cabo el año pasado por la Asociación Médica Americana, en el que se ocultaron cámaras de vídeo en hospitales estadounidenses, demostró que los médicos se lavaban las manos un 59% de las veces entre paciente y paciente; las enfermeras en un 45% de las ocasiones y el resto del personal sanitario en el 73% de las ocasiones. "Todos deben lavarse las manos antes y después de tocar a cada paciente, antes y después de comer, de ir al baño o de realizar cualquier tipo de técnica médica. Yo creo que esta norma se cumple, a excepción de cuando se producen urgencias, en las que lo primero es salvar al paciente", destaca el doctor Vicente Pastor.

Hoy en día las medidas de limpieza, desinfección y esterilización son aplicadas de forma estricta en los servicios sanitarios con el fin de prevenir la aparición de infecciones hospitalarias o nosocomiales.

 De ahí la importancia de comprender los elementos normativos de practicar la asepsia rigurosa, desinfección y esterilización, de cómo deben asearse las manos, el tiempo que hay que dedicar al lavado y la forma correcta de hacerlo, son elementos cruciales que actualmente tenemos que superarlo todo el personal de salud en nuestro hospital, ya que no se observa como elemento normativo de nuestro trabajo diario cual fuere el servicio en que laboremos.

DESINFECCION Y ESTERILIZACIÓN

Antes de abordar el tema quisiera precisar algunos conceptos que ustedes trataron con los otros ponentes.

INFECCIÓN NOSOCOMIAL

Antiguamente a los hospitales se les llamaba nosocomios, de ahí que una infección nosocomial sea aquella enfermedad infecciosa ,contraída en un hospital que afecta al paciente con motivo de su estancia o de los cuidadados recibidos en el hospital, pudiendo aparecer los síntomas durante su permanencia en el centro o después del alta.

LIMPIEZA

Es la técnica de saneamiento que incluye acciones metódicas y programadas que tienen por finalidad remover y separar de las superficies inertes mediante métodos físicos y mecánicos la suciedad que sirve de soporte y nutrientes a los microorganismos.

DESINFECTANTE

Agente que elimina la carga microbiana total en superficies inanimadas tales como Habitaciones

ANTISEPTICO

 Agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patógenos sobre piel y/o mucosas (sólo pueden aplicarse externamente sobre seres vivos).

ASEPSIA

Asepsia: se le da el nombre a todos los métodos y procedimientos utilizados por el personal de salud, mediante los cuales se suprimen o disminuyen los microorganismos capaces de producir enfermedades.

ANTISEPSIA O DESINFECCION

Antisepsia es el conjunto de procedimientos físicos, mecánicos y preferentemente químicos, que se emplean para destruir los gérmenes patógenos.

 ESTERILIZACIÓN

Completa eliminación y destrucción de todas las formas de vida microbiana que contiene un objeto o sustancia, y que se encuentran acondicionados de tal forma que no pueden contaminarse nuevamente.

En la protección de los pacientes contra la infección gran parte de nuestros quehacer diario se relaciona con la prevención de la transmisión de microorganismos. Por esta razón la aplicación de atención que se les da a los pacientes.

De la rigurosa aplicación de la asepsia dependen:

1. La seguridad del paciente, familiar y personal ante el riesgo de contraer o transmitir infecciones intra hospitalarias

2. La cantidad de la atención hospitalaria

3. La disminución de los costos socioeconómicos derivados de la hospitalización

Dada la importancia de la problemática es imprescindible que todos tomemos conciencia al respecto, con el irrestricto cumplimiento de normas de técnicas de asepsia y de esterilidad es posible controlarlo.

DESINFECCIÓN

Es el proceso que mata o destruye casi todos los microorganismos que producen enfermedad, con excepción de los esporos bacterianos.

Los desinfectantes se usan en objetos inanimados y se clasifican de acuerdo al nivel de acción desinfectante en:

•Desinfectantes de alto nivel. (D.A.N.): matan bacterias vegetativas, bacilo de tuberculosis, hongos, virus lipídicos y no lípidos, pero no necesariamente alto número de esporos bacterianos. Ej.: formaldehído, glutaraldehído, peróxido de hidrógeno, ácido peracético.

•Desinfectantes de nivel intermedio (D.N.I.): matan bacterias vegetativas, algunos hongos, bacilo de tuberculosis y la mayor parte de los virus. No eliminan los esporos bacterianos resistentes. Ej.: Alcohol etílico e isopropílico, cloro y compuestos del cloro, iodóforos.

•Desinfectantes de bajo nivel (D.B.N.): matan las bacterias vegetativas, algunos hongos y algunos virus, pero no actúan sobre bacilo de tuberculosis y esporas bacterianas. Ej.: Compuestos de amonio cuaternario.

Para la elección del desinfectante para el procesamiento del instrumental es necesario utilizar la categorización propuesta por Spaulding que clasificó estos elementos en

•CRÍTICOS Ý son los objetos que entran en contacto con el torrente sanguíneo o con cavidades estériles. La mayoría de estos elementos deben esterilizarse.

•SEMICRITICOS Ý son los objetos que entran en contacto con las mucosas o con la piel no intacta y deben estar libres de todos los microorganismos, excepto alto número de esporas bacterianas.

Estos elementos requieren desinfección de alto nivel.

•NO CRÍTICOS Ý son los objetos que entran en contacto sólo con piel sana. Hay muy bajo riesgo de transmitir agentes infecciosos por estos elementos.

Los desinfectantes son sustancias químicas que por su característica pueden ser antisépticos y desinfectantes y/o esterilizantes.

Los antisépticos

Son sustancias orgánicas o inorgánicas que sirven para la antisepsia cutánea y para  neutralizar la infección inhibiendo la proliferación de gérmenes. Es importante que reúna las siguientes características:

• Determinar características del agente tópico: no absorbible, reducción rápida de la flora, espectro de actividad

• Evaluar seguridad y eficacia en reducir el recuento de microorganismos

• Aceptación por el personal que lo va a usar y que sea económico

Antisépticos

Alcoholes:

Lesionan la membrana celular de los microorganismos y desnaturalizan proteínas celulares. Desorganizan la estructura fosfolipídica.
No destruyen esporas y tienen una acción germicida lenta.
Los alcoholes de cadena corta tienen un efecto nocivo mayor que los de cadena larga.
Se utilizan en concentraciones del 50 al 70%.
Los más utilizados son el etanol e isopropílico.

Iodo:

Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de proteínas y ácidos nucleicos. Inactiva proteínas y enzimas por oxidación de los grupos -SH a S-S, pudiendo atacar también grupos amino, indoles, etc.
Se utiliza como desinfectante de la piel (tintura de iodo: yodo molecular 2% y yoduro de sodio 2% en alcohol), aunque es irritante.
Es efectivo contra esporas en una concentración de 1600 ppm de iodo libre.

Agentes iónicos y anfóteros:

Son sustancias que lesionan la membrana celular debido a que desordenan la disposición de las proteínas y de los fosfolípidos, por lo que se liberan metabolitos desde la célula, se interfiere con el metabolismo energético y el transporte activo.
No son esporicidas ni tubercolicidas aún en altas concentraciones.
Su principales ventajas se hallan en que son inodoros, no tiñen, no son corrosivos de metales, estables, no tóxicos y baratos.

Catiónicos: Sales de amonio cuaternarias. Tienen mayor actividad a pH alcalino y los Gram + son más susceptibles.
Aniónicos: Jabones y ácidos grasos. Tienen mayor actividad a pH ácido y son eficaces contra Gram +.
Anfóteros: Actúan como catiónicos o aniónicos según el pH.

Organo Mercuriales:

Estos tipos de compuestos se combinan con los grupos -SH de las proteínas, inactivando enzimas.
Dentro de los mercuriales orgánicos se encuentran el metafen y el merthiolate.

Peróxido de Hidrógeno:

Es un antiséptico débil, con capacidad oxidante y formadora de radicales libres.
Actualmente, el peróxido de hidrógeno gaseoso se está utilizando como desinfectante de superficies o descontaminante de gabinetes biológicos debido a que no posee las propiedades tóxicas y cancerigenas del óxido de etileno y formaldehído.

Colorantes:

Interfieren en la síntesis de ácidos nucleicos y proteínas (acridina) o interfieren en la síntesis de la pared celular (derivados del trifenilmetano).
La acridina se inserta entre dos bases sucesivas del DNA separándolas físicamente. Esto provoca errores en la duplicación del DNA.
Los derivados del trifenilmetano (violeta de genciana, verde de malaquita y verde brillante) bloquean la conversión del ácido UDP-acetilmurámico en UDP-acetilmuramil-péptido.

Desinfectantes y/o Esterilizantes

 Son agentes químicos que destruyen todas las formas proliferantes  o vegetativas  de los microorganismos eliminando completamente de los objetos inanimados. Por ello pueden ser bactericidas, funguicidas, esporicidas y virucidas.

Cloro:

El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes que actúan sobre proteínas y ácidos nucleicos de los microorganismos.
Oxidan grupos -SH, y atacan grupos aminos, índoles y al hidroxifenol de la tirosina.
El producto clorado más utilizado en desinfección es el hipoclorito de sodio (agua lavandina), que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y además es efectivo en un amplio rango de temperaturas.
La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe al ácido hipocloroso (HClO) y al Cl₂ que se forman cuando el hipoclorito es diluido en agua. La actividad germicida del ion hipocloroso es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar fácilmente en la célula a través de la membrana citoplasmática. En cambio, el ácido hipocloroso es neutro y penetra fácilmente en la célula, mientras que el Cl₂ ingresa como gas.

Hipoclorito de sodio estabilizado

El AMU 218® es un producto obtenido por un proceso electrolítico completo de una solución de cloruro de sodio (NaCl), generando de esta forma hipoclorito de sodio (NaClO) que es estabilizado por una muy baja concentración de hidróxido de sodio (NaOH o soda cáustica). Además, durante la elaboración se le adicionan coadyuvantes, como reductores de los niveles de oxígeno naciente y anticorrosivos, que inhiben los procesos corrosivos y oxidantes [8] que ya fueron descriptos, y son conocidos, para esta solución. Debe destacarse que el método de obtención de AMU 218® es diferente a los empleados para la manufactura de la lavandina común, interviniendo este sistema novedoso en la generación de características particulares diferenciales que favorecen la aplicación del producto en las tareas de desinfección de alto nivel y esterilización en medio líquido.

El producto contiene como principio activo Hipoclorito de sodio al 0,026%, correspondiendo a 250 ppm de cloro libre; como excipientes: 4,0% de Hidróxido de sodio, 0,39% de cloruro de sodio, agua y coadyuvantes [9].

Esta solución cumple la función de desinfectante con amplio espectro de acción, de elevada eficacia, con acción esterilizante para ser utilizada en desinfección de alto nivel del instrumental endoscópico, del equipo médico, del instrumental quirúrgico y de los instrumentos odontológicos (cabe aclarar que el fabricante recomienda que el instrumental endoscópico debe ser no reparado o en su defecto reparado en su casa matriz de fabricación para evitar posibles filtraciones del desinfectante y daños al instrumental).

Su acción microbicida in Vitro frente a los diferentes microorganismo más comunes en el ámbito hospitalario se evaluó según el Test de suspensión modificado por Finzi y Mosconi [10,11] como así también su actividad esporicida in vitro sobre el Bacillus subtilis A.T.C.C. 6633. Se obtuvieron los aislamientos bacterianos de material patológico extraído de los pacientes internados en el Hospital Policlínico Sant’Orsola - Malpighi de Bolonia - Italia. Los resultados se resumen en la siguiente tabla:

Como es de esperar debido a su agente microbicida, el AMU 218® tiene un amplio espectro de acción, que comprende bacterias Gram (+) y (-), hongos más comunes que se pueden detectar en el contexto hospitalario y virus tan peligrosos como los de la hepatitis B y del SIDA.

Se demostró que, sobre material limpio, un período de contacto de 5 o 15 minutos es suficiente a la concentración del 20 y 10%, respectivamente; siendo en estos casos no necesario enjuagar el material mientras que 1 minuto de inmersión en la solución concentrada provee un grado de desinfección de alto nivel (recomendado para emergencias donde no se pueda reesterilizar el material), necesitándose en este caso un enjuague con agua destilada estéril.

El producto tiene acción esporicida por períodos de contacto superiores o iguales a 5 a 15 minutos para ambas diluciones y por lo tanto puede emplearse luego de esos tiempos como un esterilizante químico.

Al analizar el efecto del AMU 218® (1, 5, 25 y 50%) sobre la inhibición del crecimiento de cultivos de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Cándida albicans y Hepatitis B en presencia de 10% de suero equino no se observó ninguna alteración en los tiempos de contacto [13].

Debido a su acción de desinfectante de alto nivel puede emplearse en el lavado de

Debe dejarse el instrumento durante 15 minutos dentro de la solución. No requiere enjuague

Solución al 10%

Debe dejarse el instrumento durante 30 minutos dentro de la solución. No requiere enjuague

Mecanización del proceso

La mayor eficacia en el procesamiento de material contaminado se logra mecanizando el sistema mediante máquinas lavadoras que cumplen un ciclo previo de eliminación de materia orgánica con detergentes enzimáticos o quirúrgicos, enjuague, y una segunda etapa de exposición a la solución desinfectante y secado, reduciéndose de esta manera el manipuleo del instrumental y el riesgo de recontaminación al retirarse el material listo para usar.

Aldehídos:

Son agentes alquilantes que actúan sobre proteínas, lo que provoca modificación irreversible de enzimas e inhibición de la actividad enzimático (Adición nucleofílica de grupos -NH₂ y -SH).
Se utilizan como desinfectantes y esterilizantes.
Destruyen esporas.
El glutaraldehído es el único esterilizante efectivo en frío.
El formaldehído como gas se utiliza para descontaminar edificios, ambientes, etc. El formaldehído gaseoso se obtiene por calentamiento del paraformaldehído (OH (CH₂O)_n-H), lo que produce las despolimerización de este compuesto y la liberación de formaldehído.
El formaldehído tiene la desventaja de ser muy irritante y perder actividad en ambientes refrigerados.

Compuestos Fenólicos:

Son desinfectantes que provocan lesiones en la membrana citoplasmática porque desordenan la disposición de las proteínas y fosfolípidos. Esto causa filtración de compuestos celulares, inactivación de enzimas y lisis.
El fenol no es usado a menudo como desinfectante por su olor desagradable, por ser muy irritante y por el resido que queda luego de tratar las superficies.
Los derivados del fenol más utilizados son el hexaclorofeno (compuesto difenílico) y los cresoles (alquil fenoles). Estos son muy efectivos a bajas concentraciones contra formas vegetativas de bacterias.
No son efectivos contra esporas.

Oxido de Etileno:

Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Sirve para esterilizar material termo sensibles como el descartable y plástico, equipos electrónicos, bombas cardiorrespiratorias, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y además cancerigeno.

NIVELES Y AGENTES DE DESINFECCION

PRINCIPIOS DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN

·         La higiene ambiental contribuye en gran medida al control de las infecciones

·         El medio ambiente inanimado es poco importante en la adquisición y diseminación de infección que las manos del personal pueden vehiculizar microorganismos  de los elementos o equipos próximos al paciente

·         La desinfección de superficies inanimadas pueden llevarse  a cabo por medio de agentes físicos o químicos ( desinfección domestica: pisos, paredes, muebles, equipos médicos, etc; desinfección de instrumentos quirúrgicos ).

·         La limpieza y desinfección de superficie  no es idéntica a la de los equipos usados  con el paciente

·         Durante la higiene debe minimizarse la turbulencia para prevenir la dispersión del polvo que puede contener microorganismos.

·         Los productos de limpieza y desinfección deben seleccionarse en base a su uso, eficacia, aceptabilidad, seguridad y costo.

·         La naturaleza de la contaminación microbiana, influye en los resultados de la desinfección química. Las bacterias, virus, esporas, hongos están presentes en el aire y la superficie del ambiente.

·         Los productos orgánicos ( sangre, plasma, heces, tejidos, etc) absorben el potencial germicida  e inactiva algunos desinfectantes. Por ello una buena limpieza vigoriza  la acción destructiva de los desinfectantes.

·         La suciedad protege a los microorganismos del contacto con agentes letales como desinfectantes y esterilizantes.

·         La aplicación directa de la solución desinfectante ( domestico o inmersión de instrumental) es muy efectiva  que por rocío con aerosol .

·         La desinfección es inactivo en presencia de materia orgánica. No penetra los aceites o grasas adheridos al instrumental.

·         En cualquier sector la limpieza y la desinfección  se debe efectuarse con un orden.

·         Iniciar desde las zonas  menos sucias, progresando a las más sucias.

·         Iniciar desde las zonas mas altas progresando a las bajas

·         Las superficies mas altas deben limpiarse con un fregadero especial impregnado un agente desinfectante evitando la dispersión.

·         Se debe observar si hay manchas, herrumbre o detritus en el instrumental se debe retirar para favorecer la eficacia desinfectiva. De igual forma si hay manchas en paredes o techos por efecto de cañerías deben ser reparados para evitar el desarrollo de hongos ambientales.

·         Los desinfectantes deber ser bactericidas, pseudomonacida, fungida y esporocida.

·         Las paredes, ventanas y puertas incluyendo las manijas deben limpiarse totalmente en forma regular.

·         Las superficies horizontales incluyendo mesas, camas, sillas, repisas u otras instalaciones adheridas a la pared deben limpiarse con un paño embebido con un detergente desinfectante.

·         Las ropas contaminadas o manchadas deben ser embolsado en el mismo ambiente, rotulado y transportado para su limpieza.

·          Para la desinfección de instrumental o equipos se seleccionaran las soluciones según nivel desinfección que uno quiere alcanzar.

·         Dentro del ambiente restringido (quirófanos, etc) deben estar las personas absolutamente necesarios para la intervención.

·         Los pisos del quirófano deben limpiarse con una solución detergente desinfectante después de cada procedimiento. De igual manera se procederá con los equipos e instrumental empleados.

·         La limpieza terminal del día debe efectuarse moviendo todos los elementos  y equipos que apoyan en el piso.

·         La calidad de los desinfectantes se controlará según sus especificaciones técnicas.

·         Las características químicas deben controlarse cada 2 0 3 semanas

·         El almacenamiento debe efectuarse en un lugar fresco ( temperatura inferior a los 25 °C y oscuro, envases herméticos y tiempo de almacenamiento no debe superar los 120 días.

ESTERILIZACIÓN

Los procedimientos empleados para tales propósitos deben ser efectivos contra toda clase de microbios y ser relativamente insensibles a su estado metabólico y así esos agentes, a diferencia de los agentes quimioterapéuticos, no necesitan diferenciar su citotoxicidad entre microbios y células huésped.

Agentes físicos

Calor: Uno de los mecanismos se basa en la aplicación de altas temperaturas, en este caso la  esterilización por calor se basa en la desnaturalización proteica y la desorganización de las membranas lipídicas.

Este procedimiento puede ser por calor húmedo y se emplea para esterilizar todo material excepto aquel que pueda sufrir algún deterioro. El proceso es rápido, todos los organismos son susceptibles y el agente penetra la masa y alcanza superficies que podrían ser protegidas a los desinfectantes químicos.

Los hongos, la mayoría de los virus y las células vegetativas de bacterias patógenas son eliminadas en pocos minutos a 50 - 70°C y aún esporas, mucho más resistentes, de clostridium y otros patógenos generadores de esporas pueden esterilizarse en unos minutos a 100°C.

En la esterilización de medios de cultivo y de instrumentos en cirugía se emplea el autoclave con vapor a 121°C durante 15 a 20 minutos y una sobrepresión de 1 atm, o 134°C durante 5 minutos a una sobrepresión de 2 atm.

La esterilización por calor seco de bacterias o virus requiere la acción de altas temperaturas para obtener un daño irreversible, empleándose en estos casos 160°C durante 2 hs. Este procedimiento tiene la desventaja que el aire no penetra los poros del material, lo que implica que el instrumental en el centro de un paquete recién alcanza los 160°C luego de un largo periodo de precalentamiento. Se emplea comúnmente en la esterilización de material de vidrio y objetos de metal.

Las condiciones a tener en cuenta son: TEMPERATURA Y TIEMPO

Para el vapor de agua saturado, existe la siguiente equivalencia entre Temperatura y Presión:

Radiación: Otro agente físico comprende las emisiones electromagnéticas de alta energía. Así las lámparas de vapor de mercurio a baja presión (lámparas germicidas) permiten obtener una luz UV de una longitud de onda menor de 300 nm. La radiación resultante provoca un daño irreversible en los ácido nucleicos, principalmente en el ácido desoxirribonucleico (ADN), generando mutaciones letales o modificaciones químicas que interfieren en la posterior replicación del ADN. Además, por métodos indirectos, la luz UV induce la generación de diversas formas de oxígeno altamente reactivas (O₃, H₂O₂ y radicales de oxígeno). Empleando este procedimiento se disminuye la carga microbiana en las superficies iluminadas en áreas donde se requiera un ambiente biolimpio.

Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.

Calor Húmedo:

El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se debe principalmente a dos razones:

a.      El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas (DNA, RNA, proteínas, etc) son producidas por reacciones que elimi0nan agua. Por lo tanto, reacciones inversas podrían dañar a la célula a causa de la producción de productos tóxicos. Además, las estructuras secundarias y terciarias de las proteínas se estabilizan mediante uniones puente de hidrógeno intramoleculares que pueden ser reemplazadas y rotos por el agua a altas temperaturas.

b.       El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. Por lo que, los materiales húmedos conducen el calor mucho más rápidamente que los materiales secos debido a la energía liberada durante la condensación.

El Autoclave es el aparato más comúnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100°C. Una temperatura de 121°C (una atmósfera de sobrepresión) con un tiempo de exposición mayor a 15 minutos sirve para destruir organismos formadores de esporas.

Ventajas del calor húmedo:

·  Rápido calentamiento y penetración

·  Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo

·  No deja residuos tóxicos

·  Hay un bajo deterioro del material expuesto

·  Económico

Desventajas:

·  No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua

·  Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos

Calor Seco:

El calor seco produce desecación de la célula, efectos tóxicos por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusión de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. El aire es mal conductor del calor, y el aire caliente penetra más lentamente que el vapor de agua en materiales porosos. La acción destructiva del calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja. Esto se debe a que las proteínas se estabilizan mediante uniones puente de hidrógeno intramoleculares que son más difíciles de romper por el calor seco.

La Estufa de esterilización es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposición que el autoclave. La temperatura varía entre 120° y 180°C, requiriéndose distintos tiempos de exposición. A 140°C se necesitan por lo menos 5 horas de exposición, mientras que a 160°C se requieren al menos 2 horas de exposición.
Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodón no pueden ser esterilizados a más de 160°C.

Ventajas del calor seco:

·         No es corrosivo para metales e instrumentos.

·         Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no volátiles.

Desventajas:

·         Requiere mayor tiempo de esterilización, respecto al calor húmedo, debido a la baja penetración del calor.

Incineración:
Se utiliza para destruir material descartable contaminado.

Acción directa de la llama:
Se lleva al rojo el material de metal como hansas, lancetas, agujas de disección.

RADIACIONES

Su acción depende de:

·  El tipo de radiación

·  El tiempo de exposición

·  La dosis

Ionizantes:

Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos, estructuras proteicas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termo sensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen alteraciones de los componentes.
Ultravioletas:

Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos debido a que forman dímeros de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la duplicación y por lo tanto la pérdida de la viabilidad de las células.
Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies.

 CLASIFICADO Y SELECCION DEL METODO DE ESTERILIZACION

 R = recomendado 1: solo si resiste la temperatura del calor húmedo
2: solo cuando no se dispone de autoclave a vapor
3: solo se deteriora con la acción del calor húmedo
4: solo para instrumental muy delicado de microcirugía
5: solo cuando no se dispone de estufas
6: solo cuando este tipo de materiales pertenece a un conjunto que debe esterilizarse con EtO
7: solo en casos de urgencia y bajo normas
8: solo cuando lo recomienda el fabricante
9: solo cuando contienen plástico o son de este material

ARMADO Y ACONDICIONADO

ENVOLTORIO SEGÚN METODO

 ALMACENADO

PRINCIPIOS DE ESTERILIZACIÓN

·         La selección  del agente para el logro de una buena esterilización  se basa especialmente en el material empleado. Las formas de resistencia , las esporas, requieren de un tiempo de esterilización crítico ( calor húmedo, calor seco, oxido de etileno, glutaraldehido activado y radiación ionizante).

·         El calor húmedo en la forma de vapor saturado a presión es eficaz para la destrucción de todas las formas microbianas, incluso las esporas ( vapor a presión – calor húmedo)..

·         La aplicación de altas temperaturas  produce en el microorganismo desnaturalización  proteica y desorganización de las membranas lipídicas.

·         La presión  mayor que la atmósfera  es vital para acrecentar la temperatura  del vapor y favorecer la destrucción microbiana por el calor.

·         El vapor a su correcta temperatura y tiempo de acción es capaz de penetrar profundamente en los tejidos  de los artículos por esterilizar, así como a sus superficies.

·         Al interactuar el vapor en la cámara de esterilización con artículos fríos se produce la condensación liberando calor, humedeciendo y calentando los productos en forma simultanea ( calor y humedad).

·         Las formas vegetativas de la mayoría de las bacterias son destruidas en pocos minutos entre temperaturas de 54 y 65°C. Pero formas esporulados pueden resistir temperaturas de 115°C por mas de 3 horas.

·         No hay ser vivo que resista temperaturas de 121°C al exponerse directamente a la acción del vapor  saturado por mas de 15 minutos con una sobrepresión 1 atmósfera / 134 °C durante 5 minutos a una sobrepresión de 2 atmósfera.

·         La esterilización al vapor es mas fácil, segura y eficaz.

·         Los artículos por esterilizar deben estar limpios, sin grasa ni aceite.

·         El vapor tiene que estar en contacto directo con los artículos en todo su volumen.

·         El vapor que entra a presión y permanece arriba del aire, desaloja el aire tanto de la cámara como del contenido del bulto por esterilizar forzando  a salir a través del orificio de descarga.

·         Cuando el aire queda atrapado en la cámara como en el interior de los bultos, la acción bactericida del vapor disminuye en proporción directa con el volumen de aire contenido.

·         La esterilización por calor seco  de microorganismos requiere de altas temperaturas para obtener el daño irreversible ( 160° C durante 2 horas). Este procedimiento tiene la desventaja  que el aire no penetra los poros  del material, lo que implica  que el instrumental en el centro del paquete alcanza los 160 °C después de un largo periodo de esterilización.

·         Los materiales esterilizados  deberán presentar indicadores externos e internos.

·         Los agente s químicos producen la disolución de la capa lipídica de las membranas celulares por acción de detergente, por alteraciones irreversibles de proteínas y ácidos nucleicos con desnaturilizantes, oxidantes.

·         La velocidad de desinfección esterilizante aumenta con la concentración  del compuesto y con la temperatura.

·         El instrumental quirúrgico deberá estar totalmente  sumergido en la solución esterilizante, de tal manera la solución deberá alcanzar 2.5 por encima del instrumental.

·         El instrumental mas pesado se colocará al fondo de la bandeja . los instrumentales con bisagra  se deben abrir para la acción efectiva de la solución.

·        Materiales usados dentro del campo estéril, deben ser estériles

·        No se consideran estériles los bordes de las envolturas una vez que se abren los sobres

·        La bata se considera estéril en el frente de los hombros hasta el nivel de la mesa quirúrgica

·        La mesa quirúrgica es estéril solo la superficie superior

·        El personal quirúrgico y los artículos estériles estarán solo en el contacto con las áreas estériles. El personal y artículos NO ESTERILES ESTARAN EN CONTACTO SOLO CON AREAS NO ESTERILES

·        El movimiento dentro o alrededor de un área estéril debe ser cuidadoso para que no cause contaminación

·        Los materiales ( batas, equipo y otros) húmedos se clasifican como contaminantes

·        Artículos y materiales con dudosa esterilidad se consideran contaminados

MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA EL PERSONAL

Medidas de higiene:

No salpicar pisos, paredes, materiales o a las personas en el área de lavado.
No dejar jabones mojados dentro de las piletas
Proceder al lavado de manos antes y después de cada procedimiento
No depositar materiales en lugares húmedos, no higiénicos o en precario estado de construcción
Evitar corrientes o movimientos de aire dentro de las áreas de la central de esterilización
Evitar ventiladores
Proceder a erradicar cualquier tipo de insecto habitual en el área. Hacerlo sin salpicar con los productos de fumigación las áreas, materiales o personas. Estos productos no deberán ser tóxicos para las personas
Evitar en el área todo tipo de construcción o reforma no programada
El personal deberá usar su uniforme completo
El personal deberá evitar el uso de esmaltes de uñas, cosméticos, joyas para no contaminar los materiales
La limpieza de la Central se hará en forma húmeda una vez por turno. No utilizar plumero ni escobas
No guardar materiales a procesar en la zona de bajo-pileta porque se puede mojar
No apoyar materiales limpios en el piso
No utilizar cortinas
No tener plantas en el área
No comer, fumar o beber en el área
Los armarios deberán ser cerrados
No manipular innecesariamente los materiales procesados
No apoyar manos, cuerpo u otros objetos sobre los materiales procesados. No mojarlos
No escribir sobre los envoltorios
No apoyar los materiales aún calientes sobre superficies frías o húmedas
Resguardar los envoltorios de rotura
La Central de Esterilización debe constituir un lugar higiénico y bioseguro

BIBLIOGRAFÍA

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9. Novedades de desinfección de alto nivel:agentes halogenados no corrosivos.. En http://www.drwebsa.com.ar/fudesa/f02_08/halogen.htm
10. Esterilización yDesinfección. En http://www.sadi.org.ar/esterilizacion.htm

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